Всеукраинская ассоциация озонотерапевтов

Симутис И.С., Бояринов Г.А.,  Калентьев Г.В.
Военно-медицинский институт

Нижний Новгород, Россия

Внутривенное капельное введение озонированного физиологического раствора (ОФР) – простой и эффективный способ парентерального воздействия. Он позволяет максимально эффективно использовать мощные каталитические, окислительные свойства озона. Инфузия озонированного физиологического раствора осуществляется из стандартных флаконов различного объёма внутривенно [1,2]. 

 Однако и по сей день существует достаточно проблем озонотерапии актуальных для немедленного разрешения. Одной из них является потеря озона из ОФР непосредственно в инфузионной системе [4,5].

Материалы и методы. Работа проводилась на кафедре Анестезиологии, Реаниматологии и Трансфузиологии Военно-медицинского института, а также на базе отделения анестезиологии и реанимации МЛПУ ГКБ № 13. Исследованию подвергнуты результаты оценки потерь озона из ОФР при инфузии через стандартные инфузионные магистрали [3], а также через предложенное нами устройство. Выполнено 112 измерений концентрации озона в ОФР на выходе из флакона и на “конце иглы”.  Измерение озона производилось спектрофотометрически на медицинской озонотерапевтической установке УОТА-60-01 «МЕДОЗОН» с микропроцессорной системой управления, а также йодометрически по общепринятой методике.

Целью создания устройства является  снижение  потерь озона, а также поддержание стабильной скорости инфузии озонированного физиологического раствора.

            Данная цель достигается наличием в предлагаемом нами устройстве воздушной ловушки из артериальной части универсальной диализной кровопроводящей магистрали (производитель Fresenius, модель - FA204C), а также перцизионного регулятора скорости введения растворов (производитель - Bbraun, модель - Exadrop). Расположение элементов устройства следующее: после флакона с ОФР следует артериальная диализная магистраль с воздушной ловушкой, далее магистраль соединяется с перцизионным роликовым регулятором скорости, позволяющим более точно, по сравнению с роликовым регулятором, осуществлять дозирование вводимых растворов, за счет наличия на нем дискретной и откалиброванной шкалы скорости инфузии. После перцизионного регулятора следует соединение типа Luer.  

            Сборка устройства осуществляется согласно принципам асептики непосредственно перед началом инфузии ОФР. Собранная, таким образом инфузионная система перед использованием заполняется из флакона с ОФР. Через резиновую пробку во флакон вводится одноразовая игла – воздушный выпускник.

Устройством работают следующим образом. Заполненную систему соединяют с иглой для венепункции или катетером. Осуществляют венозный доступ. Далее устанавливают требуемую скорость инфузии на перцизионном роликовом регуляторе. По окончании инфузии систему подвергают санитарной обработке.

Результаты и их обсуждение. Анализ полученных результатов, в сравнении со стандартной системой для инфузии, показал достоверное снижение потерь озона в предлагаемом нами устройстве в среднем на 43,3% процента. Такой результат достигается, прежде всего, за счет особой конструкции воздушной ловушки, отличающейся от стандартной тем, что в ней минимизирован контакт раствора с воздухом, инфузия раствора осуществляется непосредственно в заполненную часть емкости ловушки, а ток жидкости максимально приближен к ламинарному типу.

Выводы и практические рекомендации. Использование устройства приводит к достоверному сокращению количества инфузий ОФР в рамках курса озонотерапии, сокращению длительности вышеуказанных процедур, снижению количества ятрогенных осложнений, а также стоимости лечения.

            Список литературы:
1. Бояринов Г.А., Соколов В.В. Теоретические предпосылки применения озона и гутимина для повышения эффективности искусственного кровообращения. Монография  “Озонированное искусственное кровообращение”.- Н.Новгород. - 1999.-  С.5-6. 

2.  Масленников О.В., Андосов С.В., Грибкова И.А., Еремина Л.Н. Озонотерапия при внутренних болезнях // Материалы IV Всероссийской научно-практической конференции «Озон и методы эфферентной терапии в медицине». –– Н.Новгород, 2000. – С. 43-44. 

3.  Морозов М.А. Хирургия: справочник медицинской сестры.- Издательский дом «Питер».- 2000.- С. 352.

4. Назаров Е.И. Некоторые причины ошибок дозировки озона при внутривенном введении ОФР и способы их преодоления // Материалы Первой Украинско-Русской научно-практической  конференции «Озон в биологии и медицине». - Симферополь, 2003. – С.7-8.

5. Разумовский  С.Д.  Стабильность озона и озонидов в растворах и пути ее повышения // Материалы IV Всероссийской научно-практической конференции «Озон и методы эфферентной терапии в медицине». – Н.Новгород, 2000. – С. 11-12. 

Высеканцев И.П., Зинченко В.Д., Белых И.А., Бабинец О.М., Буряк И.А..
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины

г. Харьков, Украина

Микробицидное действие озона привлекает внимание исследователей в связи с практической значимостью данной проблемы, а также как удобная модель для исследования некоторых общебиологических закономерностей влияния озона на биологические системы. Учитывая высокую активность озона в реакциях с органическими и неорганическими веществами, важно учитывать влияние среды инкубации микроорганизмов при исследовании общего характера воздействия  на них озона и при оценках количественных характеристик этого воздействия. Известно, что эффективность воздействия озонированных растворов на микроорганизмы зависит от состава этих растворов [1, 2]. В настоящем исследовании представлены экспериментальные данные о кинетике гибели бактерий E.coli в высушенном состоянии и в различных жидких средах  под действием высоких доз озона и о стимулирующем эффекте малых доз озона на пролиферативную активность указанных бактерий.

Исследования проводили на культуре  бактерий E.coli, штамм B  (из Российской коллекции промышленных микроорганизмов ГНИИ генетики, Москва). В качестве источника озона использовали генератор озона с разрядными трубками

безбарьерного типа [7]. Бактерии выращивали на мясопептонном агаре (МПА) и в минеральной среде М9 [3]. Жизнеспособность бактерий оценивали чашечным методом Коха по числу макроколоний, сформировавшихся на МПА [4]. Логарифмические кривые роста периодических культур бактерий строили по оптической плотности [5].Статистическую обработку результатов проводили по общепринятым в биологии методам [6].

При изучении влияния высоких доз озона на бактерии в высушенном состоянии использовали герметичную камеру объемом 1 л, в которую помещали бактерии на миллипоровых бактерицидных фильтрах (Millipore USA) и продували озоно-воздушной смесью. Концентрация озона в газовой смеси составляла 6,8 мг/л при потоке 2 л/мин, температура комнатная. Была исследована кинетика гибели бактерий. Через 3 часа обработки озоно-воздушной смесью число КОЕ снижалось c 1,2 ? 10⁸ до 7,8 ? 10⁴, а

через 6 часов все бактерии погибали.

Таким же способом изучали действие озоно-воздушной смеси на бактерии, высеянные на МПА. Было установлено, что в данном случае число КОЕ через 3 часа снижалось на 1 порядок, а  через 6 часов все бактерии также погибали.

В экспериментах по изучению влияния озона на клетки в жидкой среде введение озона в суспензию клеток проводили двумя способами. Первый способ состоял в том, что в дистиллированную воду, мясопептонный бульон (МПБ), физиологический раствор вносили бактерии, а затем полученные суспензии барботировали озоно-кислородной смесью с концентрацией озона 6,8 мг/л в течение 10, 20, 60 минут. В этом варианте эксперимента было установлено, что бактерии, подвергавшиеся действию озона в дистиллированной воде и физиологическом растворе, погибали к 60 минуте. В МПБ динамика гибели бактерий была менее выраженной, и через 60 минут количество КОЕ снижалось с 2,9 ? 10⁸ до 1,6 ? 10³.

При втором способе проведения эксперимента среды инкубации сначала барботировали в течение 30 мин  озоно-кислородной смесью с концентрацией озона

6,8 мг/л, затем в озонированную среду вносили бактерии  и инкубировали полученные суспензии при 20⁰С в течение 60 минут. Во всех средах через 60 минут полная гибель бактерий не происходила. Инактивирующее действие озона было наименее выраженным в МПБ. При построении кинетических кривых гибели бактерий в жидких средах можно было выделить две фазы снижения концентрации бактерий под воздействием озона. Начальная фаза характеризуется малой гибелью бактерий, а вторая фаза – быстрой гибелью по принципу «доза-эффект».

При культивировании бактерий E.coli в озонированной малыми дозами озона среде М9 установлено, что при дозах до 0,062 мг/л кривые роста бактерий не отличаются от контрольных. При дозах озона 0,12-0,35 мг/л наблюдается стимуляция пролиферативных свойств бактерий и роста периодической культуры. При концентрации озона 0,57 мг/л и выше наблюдается ингибирование роста бактериальной культуры.

Полученные результаты позволяют сделать следующие выводы.

1. Бактерии на сухих поверхностях в меньшей степени повреждаются озоном, чем в водных средах.

2. Летальное действие озона на бактерии в МПБ менее выражено, чем в дистиллированной воде и физиологическом растворе. По нашему мнению, это связано с взаимодействием озона с органическими веществами, входящими в состав МПБ, в результате чего концентрация свободного озона в системе снижается.

3. Экспериментально на примере бактерий E.coli показана стимуляция пролиферативной активности клеток при воздействиии малых доз озона. Возможно, что в этом случае в ростовой среде увеличивается число окисляемых субстратов, необходимых для дыхательного метаболизма бактерий.

Литература
1. Верхнев В.А., Романова М.И. Сравнительная характеристика бактерицидного действия озонированного физиологического раствора различной концентрации//Нижегор. мед. журн. – 2003. Приложение «Озонотерапия». С.18

2. Филатов А.В., Конопельцев И.Г., Черных Е.В. Антимикробные свойства озонированных растворов// Нижегор. мед. журн. – 2003. Приложение «Озонотерапия». С.20

 3. Миллер Дж. Эксперименты в молекулярной генетике.–М.:Мир,1976.-436с.

4. Луста К.А., Фихте Б.А. Методы определения жизнеспособности микроорганизмов/Ред. Ерошин В.К.-Пущино: ОНТИ НЦВИ АН СССР.-1990.-186с.

5. Иерусалимский Н.Д.Основы физиологии микробов.-М.: Изд-во АН СССР, -1963.-242с.

6. Статистична обробка результатів біологічних експериментів./Навч. посіб./ Донецк.Університет.-Донецк, 1999.- 186с.
7. Зинченко В.Д., Голота В.И., Сухомлин Е.А., Тарли Г.В., Белых И.А. Лабораторное оборудование для применения озоновых технологий в биологии и медицине//Пробл. криобиологии. – 2005. – Т.15, №4. – с.712-718.

Козин Ю.И., Дюбко Т.С. ¹                                                        

Харьковский национальный медицинский университет